Zuiveringsapparatuur voor Oligo-zuivering

1. Zuivering door gelelektroforesechromatografie
Gebruik denaturerende polyacrylamidegelelektroforesechromatografie voor zuivering.Het denaturerende middel is over het algemeen 4M formamide of 7M ureum, de concentratie acrylamide ligt tussen 5-15% en het aandeel methacrylamide ligt hoofdzakelijk tussen 2-10%.
Na elektroforese moet de positie van de nucleïnezuurband worden bepaald onder bestraling met ultraviolet licht, de gel die het doelnucleïnezuur bevat, wordt afgesneden, het nucleïnezuur wordt verbrijzeld en uitgeloogd, en vervolgens wordt de uitloogoplossing geconcentreerd, ontzout, gekwantificeerd en gevriesdroogd.

2. DMT-aan, HPLC-zuivering
Kies de DMT-Aan-modus tijdens de synthese, het ruwe product werd gecentrifugeerd en geconcentreerd bij kamertemperatuur om overtollige ammoniak na de aminolyse te verwijderen.
De scheiding werd uitgevoerd met behulp van een C18-kolom met acetonitril en 10% triethylamine-azijnzuur (TEAA) als eluens.Nadat de elutie is voltooid, wordt deze geconcentreerd en vervolgens wordt de DMT-groep verwijderd met trifluorazijnzuur.Na neutralisatie worden enkele zouten en kleine moleculen via een afgesneden buis verwijderd en uiteindelijk ontzout.

Met deze methode kan een product met een hogere zuiverheid worden verkregen, maar er moet aandacht worden besteed aan het optreden van depurinatie.

3. DMT-uit, HPLC-zuivering
Kies de DMT-Off tijdens de synthese en het ruwe product werd gecentrifugeerd en geconcentreerd bij kamertemperatuur om overtollige ammoniak na ammonolyse te verwijderen.
De scheiding werd uitgevoerd met behulp van een C18-kolom met acetonitril en 10% triethylamine-azijnzuur in water als eluens.Nadat de scheiding is voltooid en gekwantificeerd, worden de porties gelyofiliseerd.

Deze methode vereist een zorgvuldige aanpassing van de scheidingsomstandigheden en kan ook relatief zuivere doelmoleculen verkrijgen.